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順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法

簡要描述:順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:李斯特氏菌增菌肉湯(LEB) 英文名稱:Listeria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g PALCAM肉湯 英文名稱:PALCAM Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g PBS緩沖液(PH7.4) 英文名稱:PBS Solution 產(chǎn)品規(guī)格:250g 7%羊血瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:7%Sheep Blood Agar Ba

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪  問  量:537

詳細(xì)介紹

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/50樣

檢測方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6596

產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列
商品介紹:

測定意義:

順烏頭酸酶(aconitase),三羧酸循環(huán)中的酶,催化檸檬酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫悪幟仕?。檸檬酸本身不易氧化,在順烏頭酸酶作用下,通過脫水與加水反應(yīng),使羥基由β碳原子轉(zhuǎn)移到α碳原子上,生成易于脫氫氧化的異檸檬酸,為進(jìn)一步的氧化脫羧反應(yīng)作準(zhǔn)備。

測定原理

ACO催化檸檬酸轉(zhuǎn)化成異檸檬酸,異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH,導(dǎo)致340nm處光吸收上升。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

25mL Tricine-SDS Sample Buffer,2X), reducing  Tricine-SDS Sample Buffer,2X), reducing  常溫保存

100µL 小鼠抗c-Myc標(biāo)簽單抗 Anti c-Myc-Tag Mouse MAb -20℃保存

2 ug PT2/GFP PT2/GFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL RNase-free PVP K30溶液,20%  常溫

2 ug pCYB 1 pCYB 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

產(chǎn)芽孢肉湯 Sporulation Broth 250g

5g D- 核糖 D-Ribose 4℃保存

50T 炭疽桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mg SMT(iNOS抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   常溫保存

10uL HRP標(biāo)記的抗抗體 Anti Biotin Ab,HRP 4℃保存

順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法Rabbit Anti-Avidin/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml

phospho-Smad3(Ser204)  磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格: 0.1ml

XRCC1  X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

TSPAN6  四分子交聯(lián)體6抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

GFAP  膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

RPL19  核糖體蛋白L19抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

CEP97  中心體蛋白97kDa抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-13Ra2  白細(xì)胞介素-13受體a2抗體 規(guī)格: 0.1ml

SCRO/DCUN1D1  鱗狀細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-M-CSF Receptor(Tyr546)  磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

PPIB/Cyclophilin B  親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIB抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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