儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

WI-38AV13細胞，人SV-40轉化肺成纖維細胞 大鼠胸主動脈平滑肌細胞，VSMC細胞 CL-0010786-O(人腎透明細胞癌細胞)5×106cells/瓶×2硫普羅寧（標準品）質量規(guī)格：含量測定Tiopronin

SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2多索茶堿質量規(guī)格：>99%,BRDoxofylline

HDBEC-c 人類皮膚血內皮細胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)多索茶堿（標準品）質量規(guī)格：含量測定Doxofylline

心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl 質量規(guī)格：>98%,Syk PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl

CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽質量規(guī)格：美國進口Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt
NCI-H661細胞，大細胞肺癌細胞 人鼻咽癌細胞,HONE1細胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠白血病細胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2D-胱氨酸D-Cystine質量規(guī)格：0.98

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1D-阿拉伯糖醇D(+)-Arabitol質量規(guī)格：>98%,BR

PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 米吐爾(>98%,BC)Metol質量規(guī)格：>98%,BC

膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸吡哆醛Pyridoxal 質量規(guī)格：>98%,BR

IFNG Others Rat 大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照) 硅油Silicone oil質量規(guī)格：BR
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) N-二乙基亞硝，英文名或英文縮寫：N-nitnosodietxylamine，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

人肝臟間充質干細胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽  2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑

TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0

VERO細胞衍生株;SVP偶氮脒類引發(fā)劑V50容量：2～8℃1克

CGM1細胞，EB病毒轉化的B細胞 人結直腸腺癌細胞,LS174T細胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL1,8-桉樹腦Cineole
Paxillin Phospho-Tyr118 AntibodyU-937細胞，瘤細胞 人前列腺癌細胞,DU-145細胞 人間充質干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA鐵標準溶液（1000mg/L,溶劑：5%鹽酸） Iron solution質量規(guī)格：1000mg/L,溶劑：5%鹽酸

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B鐵標準溶液（500mg/L,溶劑：1%鹽酸） Iron solution質量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%鹽酸

ESAM Others Human 人 ESAM 人細胞裂解液 (陽性對照) 鐵標準溶液（100μg/mL(20°C)，基體:5%HCl） Iron Standard質量規(guī)格：100μg/mL(20°C)，基體:5%HCl

小鼠肝癌瘤株;H22銦標準溶液（1000μg/ml,基體：1.0 mol/L 硝酸）Indium standard質量規(guī)格：1000μg/ml,基體：1.0 mol/L 硝酸

CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 銦標準溶液（100mg/L(20℃)，基體：1％HCl）Indium standard質量規(guī)格：100mg/L(20℃)，基體：1％HCl

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