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檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*20支 改良Y平板 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9cm*10個(gè) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌成套生化鑒定管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:10種*2套/盒*5盒 改良番茄汁培養(yǎng)基 英文名稱:Tomato Juice Agar,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪  問  量:781

詳細(xì)介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6573

商品介紹:

測(cè)定意義:

CA又稱枸櫞酸,廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中,是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)步反應(yīng)的產(chǎn)物,與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。

測(cè)定原理

酸性條件下,檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定545nm吸光值的增加,即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

10g D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽 D-Glucosamine Hydrochloride  室溫干燥保存

50T O139CR檢測(cè)試劑盒   低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100 mL D/F12培養(yǎng)基(含10%胎牛血清) Cell Culture Medium -20℃保存

2 ug pBiFC-VN173 pBiFC-VN173 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10mL TE緩沖液,PH7.5  

2 ug pX459 pX459 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(中國(guó)藥典)  250g

1瓶 C-33 A [C33A]細(xì)胞株 C-33 A [C33A] 低溫運(yùn)輸和保存

茜素-β-半乳糖苷瓊脂(Aliz-gal瓊脂) Aliz-gal Agar 100g

100U Klenow 片段  

5mL Phosphatase Inhibitors Cocktail-I  Phosphatase Inhibitors Cocktail-I  常溫保存

檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒微量法C1orf125  1號(hào)染色體開放閱讀框125抗體 規(guī)格: 0.2ml

SDCCAG10  結(jié)腸抗原10抗體 規(guī)格: 0.2ml

Gibberellins  ?;撬?β-氨基乙磺酸抗體 0.1ml

GNG2  G蛋白γ2抗體/核苷酸結(jié)合蛋白γ2抗體 規(guī)格: 0.2mlCKLFSF2/CMTM2  趨化素樣因子超家族成員2抗體 規(guī)格: 0.2ml

SCYL1BP1  SCYL結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

MAGEL2  黑色素瘤抗原樣基因2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser494)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

Histone H3  組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1mlAPOB48R  載脂蛋白B受體抗體 規(guī)格: 0.2ml

TPP1/CLN2  細(xì)胞生抑制基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CD151/MER2(Ser30)  磷酸化CD151抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PDGFRA(Tyr572)  磷酸化小板源性生因子受體α 規(guī)格: 0.1mlNHEDC2  線粒體鈉/交換蛋白質(zhì)2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Integrin alpha 3/CD49c  整合素α3抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PNK1 (Ser114/Thr118)  磷酸化多聚合苷酸激3磷酸化抗體 規(guī)格: 0.1ml

IKK alpha + IKK beta  KB抑制蛋白激α/β抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Gold  膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.5mlMyosin heavy chain 1  肌球蛋白重鏈抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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